Coinoculación y cultivos esterilizados por calor de actinobacterias inhiben la germinación y formación de colonias de esclerocios de Sclerotium rolfsii

Actividad fungicida y termoestable de actinobacterias contra Sclerotium rolfsii

Resumen

En esta investigación se evaluó el efecto de la coinoculación de las actinobacterias M-14 y M-18 y de concentraciones de colonias de éstas esterilizadas por calor, sobre la germinación y desarrollo de colonias a partir de esclerocios del hongo Sclerotium rolfsii. Para la coinoculación, cuatro alícuotas de las actinobacterias se depositaron en cajas Petri con agar nutritivo y sobre ellas se colocaron esclerocios. Al tercer y quinto día se determinó el porcentaje de esclerocios que germinaron produciendo hifas y que desarrollaron colonias, respectivamente. Cuatro concentraciones (100, 75, 50 y 25%) de colonias esterilizadas por calor fueron vaciadas a cajas Petri e inoculadas con cuatro esclerocios. A las 48 h se determinó el porcentaje de esclerocios germinados que desarrollaron colonia y éstos se subcultivaron en nuevas cajas Petri conteniendo sólo agar nutritivo; a las 72 h se determinó el porcentaje de esclerocios germinados. En la coinoculación el 100, 100 y 91.7% de esclerocios formaron hifas en el testigo, M-14 y M-18 al tercer día; y el promedio de colonias formadas fue de 100, 0 y 0 para los mismos tratamientos al quinto día. Los esclerocios inoculados en las cuatro concentraciones fueron incapaces de germinar, y al subcultivarse los esclerocios previamente expuestos a la concentración de 25 % de M-14 y M-18, sólo germinaron en un 81.25 % y 56.25 %. Debido a que la cepa M-18 causó el menor porcentaje de germinación, se secuenció el gen 16S ribosomal, y el análisis BLAST permitió determinar su relación con tres especies de Streptomyces. Los resultados demostraron que esclerocios en contacto con las actinobacterias y durante la exposición a colonias esterilizadas por calor inhiben su germinación, que la exposición por 48 h a concentraciones esterilizadas mayores al 25% tiene un efecto fungicida y que la cepa de Streptomyces M-18 está relacionada a S. maritimus, S. rochei y S. enissocaesilis.